中文名:电泳 ,外文名:Electrophoresis;应用学科:化学
电泳(Electrophoresis) 是空间匀强电场作用下,带电粒子在流体中发生移动的现象。由于各物质的迁移速率有差别,故可以利用这个原理来分离物质。
生物大分子如蛋白质,核酸,多糖等大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用。在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。
如果把生物大分子的胶体溶液放在一个没有干扰的电场中,使颗粒具有恒定迁移速率的驱动力来自于颗粒上的有效电荷Q和电位梯度E。它们与介质的摩擦阻力f抗衡。在自由溶液中这种抗衡服从Stokes定律。
F=6πrvη
这里v是在介质粘度为η中半径为r的颗粒的移动速度。但在凝胶中,这种抗衡并不完全符合Stokes定律。F取决于介质中的其他因子,如凝胶厚度,颗粒大小,甚至介质的内渗等。
电泳迁移率(mbility)m规定为在电位梯度E的影响下,颗粒在时间t中的迁移距离d。
迁移率的不同提供了从混合物中分离物质的基础,迁移距离正比于迁移率。
目前所采用的电泳方法,大致可分为3类:显微电泳,自由界面电泳和区带电泳。区带电泳应用广泛,区带电泳可分为以下几种类型:
1. 按支持物的物理性状不同,区带电泳可分为:
(1)滤纸为支持物的纸电泳;
(2)粉末电泳:如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳;
(3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳;
(4)缘线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳
2.按支持物的装置形式不同,区带电泳可分为:
(1)平板式电泳:支持物水平放置,是最常用的电泳方式;
(2)垂直板电泳:聚丙烯酰胺凝胶可做成垂直板式电泳。
(3)柱状(管状)电泳:聚丙烯酰胺凝胶可灌入适当的电泳管中做成管状电泳.
3.按pH的连续性不同,区带电泳可分为:
(1)连续pH电泳:如纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳;
(2)非连续pH电泳:如聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳;